Биологическая активность альфа-2b интерферона многогранна – это противовирусная активность, иммуномодулирующая/иммунорегуляторная (влияние на продукцию ряда цитокинов, повышение клеточной цитотоксичности Т-лимфоцитов и естественных киллеров, на дифференцировку Т-хелперов, модуляцию продукции антител и др.), антипролиферативная активность (при высоких дозах) и т.д.
Биологическая активность интерферона, определяемая в лекарственных препаратах интерферона в соответствии с требованиями ВОЗ – это только противовирусная активность. Исследуется она на культуре клеток, чувствительной к интерферону, по подавлению цитопатического эффекта индикаторного вируса.
Методика очень трудоемка и продолжительна по времени, но крайне необходима. Это обусловлено прежде всего тем, что количественное определение в препарате интерферона, как белка (биохимическим, иммуноферментным методами, с помощью высокоэффективной жидкостной хроматографии и др.) не гарантирует наличия функциональной активности исследуемого интерферона, т.к. нельзя исключить возможность инактивации белка (частичной или полной) в процессе технологических процедур по очистке и концентрации субстанции.
Однако определение биологической активности альфа-2b интерферона не может быть абсолютно стандартной процедурой в силу того, что используются два биологических объекта (вирус и культура клеток, как указано выше), которые обладают способностью к изменчивости под воздействием самых различных факторов (количество клеток при посеве, плотность монослоя, возраст клеток, качество и количество вируса, качество сред и сыворотки и т.д.).
Для стандартизации этой методики по рекомендации ВОЗ определение биологической/противовирусной активности альфа-2b интерферона проводится обязательно с использованием Международного стандарта, (либо Национального стандарта, откалиброванного по Международному стандарту и оформленному в соответствии с Нормативной документацией) активность которого выражена в Международных единицах (МЕ), с дальнейшим пересчетом активности испытуемых препаратов в МЕ по рассчитанному коэффициенту.
Однако даже при соблюдении всех указанных условий наблюдается разброс результатов активности в значительном диапазоне в силу невозможности обеспечения полной стандартности используемой методики. Изложенное обусловливает необходимость введения определенных допусков при определении противовирусной активности образцов препаратов интерферона.
В связи с этим, в Фармакопеях различных стран введены достаточно широкие допуски активности препаратов интерферона. В Европейской Фармакопее (Е.Ph. 6.0), также, как и Британской Фармакопее 2009, регламентирован разброс противовирусной активности интерферона не менее 80% и не более 125% от заявленной в нормативной документации – т.е. различия активности в указанном диапазоне являются статистически незначимыми даже при использовании стандартизованных лабораторных методик и наличии всех стандартных образцов сравнения.
Следовательно, при регламентированной активности препарата (на единицу массы/объема препарата в биологическом тесте) допускается разброс активности:
– при 100000МЕ–диапазон составляет от 80000МЕ до 125000МЕ,
– при 125000МЕ – от 100000МЕ до 156250МЕ,
– при 150000МЕ – от 120000МЕ до 187500МЕ.
Таким образом, препараты могут иметь различную регламентированную биологическую активность, как указано выше, но при статистической обработке эти различия оказываются незначимыми (перекрывающиеся величины биологической/противовирусной активности), т.е. различия в активности в приведенных выше примерах недостоверны при стандартизованном по международным требованиям лабораторном определении.
Врач, использующий препараты рекомбинантного альфа-2b интерферона, должен понимать, что различия активности препаратов в регламентированных пределах, как указано выше, не могут быть выявлены по клинической эффективности не только в силу статистической незначимости указанных различий, но и в силу того, что клинические особенности заболевания и индивидуальные различия в исходном состоянии иммунной системы больных более существенно различаются по многим параметрам, что может быть обусловлено:
– нозологическими формами и клиническими особенностями заболевания каждого больного, а также его состоянием до заболевания;
– наличием сопутствующих инфекционных заболеваний;
– сопутствующей соматической патологией;
– состоянием защитных систем конкретного больного, прежде всего – его иммунной системы, а также многими другими факторами.
При этом следует учитывать, что клинические эффекты зависят в значительной степени от состава препарата, а также правильно выбранной лекарственной формы т.к. действие различных лекарственных форм, композиционного состава, способов введения обусловливает не только различную фармакокинетику и, соответственно, различную клиническую эффективность и переносимость. Это в полной мере подтверждается результатами сравнительных клинических исследованиях эффективности альфа-2b интерферона в комплексе с антиоксидантами и чистого интерферона в аналогичных дозировках – клиническая эффективность, также как и переносимость, статистически значимо различалась в пользу комплекса интерферона с антиоксидантами. Эта работа проводилась В.В. Малиновской в рамках фундаментальных исследований особенностей функционирования системы интерферона в различных возрастных категориях, начиная с внутриутробного развития, а также роли антиоксидантов в этих процессах
В опытах in vitro на культуре клеток также доказано, что использование альфа-2b интерферона вместе с токоферола ацетатом, аскорбиновой кислотой или унитиолом приводит к синергидному эффекту – повышению противовирусной активности. При этом комбинация интерферона с таурином и некоторыми другими компонентами не дает подобного эффекта.
Загрузка …
