Ю.А.Климова, А.К.Токмалаев, И.П.Балмасова.
Российский университет дружбы народов, Москва.
Научно-исследовательский медико-стоматологический институт Московского государственного медико-стоматологического университета.
Обследовано 64 больных аденовирусной инфекцией и 48 – респираторно-синцитиальной вирусной инфекцией. У всех больных исследовали цитокиновый статус с определением уровней сывороточного и спонтанного ИФН, индуцированного ИФН? и ИФН?, уровней ИЛ-1, ИЛ-2, ИЛ-4, ИЛ-5, ИЛ-6, ИЛ-12, ФНО? в сыворотке крови, спонтанной и индуцированной продукции ИЛ-2, ИЛ-6, ИЛ-12 лейкоцитами крови обследованных.
Проводили сравнительный анализ цитокинового статуса при неосложненном и осложненном течении аденовирусной и респираторно-синцитиальной вирусной инфекций. Разработаны дополнительные критерии дифференциальной диагностики исследованных инфекций: при неосложненном течении уровень сывороточного ИЛ-1 выше 12 пг/мл свидетельствует о наличии аденовирусной инфекции, при осложнении ангиной уровень сывороточного ИЛ-12 ниже 95 пг/мл и уровень индуцированной продукции лейкоцитами ИЛ-12 ниже 1800 пг/мл свидетельствуют больше в пользу аденовирусной инфекции, а уровень индуцированной продукции лейкоцитами ИЛ-6 выше 15000 пг/мл – в пользу респираторно-синцитиальной вирусной инфекции, при осложнении бронхитом уровень спонтанной продукции ИЛ-2 ниже 650 пг/мл указывает на течение респираторно-синцитиальной вирусной инфекции, при осложнении пневмонией уровень индуцированной продукции ИЛ-6 лейкоцитами крови ниже 10800 пг/мл с высокой долей вероятности свидетельствует в пользу аденовирусной инфекции. Рекомендовано применение Виферона для лечения аденовирусной инфекции, осложненной бронхитом и респираторно-синцитиальной вирусной инфекции, осложненной пневмонией.
Аденовирусная и респираторно-синцитиальная вирусная инфекции – широко и повсеместно распространенные ОРВИ, представляющие угрозу для лиц различного возраста, а особенно – для людей группы риска (страдающих сердечно-легочными хроническими заболеваниями, иммунодефицитами), у которых зачастую развиваются серьезные осложнения [1, 2]. С этими заболеваниями связывают развитие в последующем хронических обструктивных заболеваний легких [3-5]. В современной научной литературе есть данные о хорошей эффективности использования препаратов интерферона в лечении различных ОРВИ, однако опыт их применения при аденовирусной и респираторно-синцитиальной вирусной инфекциях недостаточен. Исследование взаимосвязей иммунных реакций с патогенезом заболевания, а также сравнительный анализ цитокинового профиля при данных инфекциях представляет научный интерес в силу того, что изменения в иммунной системе хозяина, развивающиеся в ответ на вирусное вторжение, во многом определяют клинические проявления болезни [6]. В связи с этим задачей данного исследования послужило проведение сравнительного анализа цитокинового статуса при неосложненном и осложненном течениях аденовирусной и респираторно-синцитиальной вирусной инфекций, а также определение дополнительных критериев их дифференциальной диагностики.
Пациенты и методы
В исследовании, проведенном на базе ИКБ №1 г. Москвы, приняли участие 64 больных аденовирусной инфекцией в возрасте и 48 больных респираторно-синцитиальной вирусной инфекцией от 15 до 59 лет. Контрольная группа включала 24 донора. Диагноз был установлен на основании клинических данных, а также лабораторного подтверждения наличия соответствующего вируса в назальном содержимом методом иммунофлюоресценции или иммунохроматографическим методом (набор фирмы «Savyon» QuickStripe). У всех больных исследовали цитокиновый статус с определением уровней сывороточного и спонтанного ИФН, индуцированного ИФН? и ИФН?, уровней ИЛ-1, ИЛ-2, ИЛ-4, ИЛ-5, ИЛ-6, ИЛ-12, ФНО? в сыворотке крови, спонтанной и индуцированной продукции ИЛ-2, ИЛ-6, ИЛ-12 лейкоцитами крови обследованных. Определение интерферонов проводили в лаборатории интерферонов НИИ Эпидемиологии и микробиологии им. Н.Ф. Гамалеи по методике, разработанной Соловьевым В.Д. и Бектемировым Т.А. Исследование показателей системы интерлейкинов проводили в лаборатории онтогенеза и коррекции системы интерферона ГУ НИИ Эпидемиологии и Микробиологии им. Н.Ф. Гамалеи под руководством проф. д.б.н. Малиновской В.В. с использованием набора реагентов для иммуноферментного определения концентраций интерлейкинов в биологических средах человека ЗАО «Вектор-Бест» г. Новосибирск. Для лечения 31 больного аденовирусной инфекцией и 30 больных респираторно-синцитиальной вирусной инфекцией применялся препарат Виферон, суппозитории ректальные (ООО «Ферон») в дозировке 1 000 000 МЕ, в состав которого входит рекомбинантный ИФН – ?2b в комплексе с мембраностабилизирующими средствами – антиоксидантами: витаминами С и Е. Назначалось по одной свече 2 раза в день с интервалом 12 часов, длительность курса составляла 5 дней. Статистическая обработка результатов проводилась непараметрическими методами с использованием критерия Манна-Уитни (пакет программ SPSS).
Результаты исследования и их обсуждение
Для проведения сопоставления цитокинового статуса при аденовирусной и респираторно-синцитиальной вирусной инфекциях был проведен дискриминантный анализ всех показателей уровней цитокинов (табл. 1).
Таблица 1. Стандартизированные канонические коэффициенты дискриминантной функции (СККДФ) показателей цитокинового статуса у больных аденовирусной и респираторно-синцитиальной вирусной инфекциями неосложненного и осложненного течения
| Характер течения инфекционного процесса | Клинические признаки | СККДФ |
| Неосложненное течение | Уровень сывороточного ИЛ-1
Уровень сывороточного ИЛ-2 |
2,192
2,037 |
| Течение, осложненное ангиной | Уровень сывороточного ИЛ-1
Уровень индуцированного ИФН? лейкоцитов Уровень сывороточного ФНО? Уровень индуцированного ИЛ-12 лейкоцитов Уровень спонтанного ИЛ-6 лейкоцитов Уровень индуцированного ИЛ-6 лейкоцитов Уровень сывороточного ИЛ-12 Уровень сывороточного ИФН Уровень индуцированного ИЛ-2 лейкоцитов Уровень сывороточного ИЛ-4 Уровень спонтанного ИЛ-12 лейкоцитов Уровень спонтанного ИФН лейкоцитов Уровень спонтанного ИЛ-2 лейкоцитов Уровень сывороточного ИЛ-6 |
6,227
4,444 4,395 3,904 3,350 3,239 3,171 2,920 2,613 2,534 2,358 1,678 1,158 0,892 |
| Течение, осложненное бронхитом | Уровень спонтанного ИЛ-2 лейкоцитов
Уровень сывороточного ИЛ-2 |
7,953
7,895 |
| Течение, осложненное пневмонией | Уровень индуцированного ИЛ-2 лейкоцитов
Уровень спонтанного ИЛ-2 лейкоцитов Уровень сывороточного ИЛ-1 Уровень индуцированного ИЛ-6 лейкоцитов Уровень сывороточного ИЛ-5 |
15,536
13,804 2,404 1,148 0,465 |
С помощью дискриминантного анализа выявлялись наиболее информативные критерии, позволяющие дифференцировать между собой два инфекционных процесса неосложненного течения, а также осложненного ангиной, бронхитом, пневмонией. Результаты дискриминантного анализа выражали абсолютной величиной СККДФ и ранжировали в соответствии с величиной этого коэффициента.
Как видно из таблицы, при неосложненном течении различия между аденовирусной и респираторно-синцитиальной вирусной инфекцией выявлялись только по содержанию в сыворотке крови ИЛ-1 и ИЛ-2, дискриминантную роль которых можно проанализировать с помощью рисунка 2.
При неосложненном течении заболеваний набор отличительных признаков между группами с различными ОРВИ были минимальными, но имеющими выраженное дифференциально-диагностическое и патогенетическое значение. Для аденовирусной инфекции были характерны довольно высокие показатели уровня провоспалительного цитокина ИЛ-1 в сыворотке крови, достоверно превышающие таковые в группе сопоставления в 28 раз (p 
В тех случаях, когда течение инфекционного процесса осложнялось ангиной, перечень различий включал наибольшее число показателей, но из этих 14 потенциально информативных параметров только 3 показывали достоверность различий между цитокиновым профилем при аденовирусной и респираторно-синцитиальной вирусной инфекциях, осложненных ангиной. К числу таких показателей относились уровень сывороточного ИЛ-12, а также уровни индуцированной секреции лейкоцитами крови ИЛ-12 и ИЛ-6. При респираторно-синцитиальной вирусной инфекции значения этих показателей превосходили таковые при аденовирусной инфекции, соответственно, в 2, 2,1 и 1,8 раз.
При неосложненном течении ОРВИ критериальное значение имел уровень сывороточного ИЛ-1, диапазоны индивидуальных значений которого представлены на рисунке 3. Значения выше 12 пг/мл регистрируются только при аденовирусной инфекции при частоте их встречаемости в 75% случаев.
При ОРВИ, осложненном ангиной, диапазоны значений трех критериальных признаков представлены на рисунке 4.
Как следует из иллюстраций, критериальной величиной для сывороточного ИЛ-12 служит 95 пг/мл. В диапазон ниже этой величины входит 87,5% случаев аденовирусной инфекции, а в более высокий диапазон – 50% случаев респираторно-синцитиальной вирусной инфекции. Информативное значение уровня индуцированной продукции лейкоцитами ИЛ-12 несколько выше. При критериальной величине в 1800 пг/мл значения ниже этой величины наблюдаются у 87,5% больных аденовирусной инфекцией, а выше – у 62,5% больных респираторно-синцитиальной вирусной инфекцией. Что касается третьего показателя, то при критериальной величине в 15000 пг/мл значения ниже этой величины отмечены у 70% больных аденовирусной инфекцией, а выше – у 75% больных респираторно-синцитиальной вирусной инфекцией.
Диапазоны значений уровня спонтанной продукции ИЛ-2 лейкоцитами крови у больных ОРВИ, осложненных бронхитом, показаны на рисунке 5.
Спонтанная продукция ИЛ-2 ниже критериальной величины в 650 пг/мл зарегистрирована у 95,4% больных респираторно-синцитиальной вирусной инфекцией, а выше – у 58,3% больных аденовирусной инфекцией.
Диапазоны значений уровня сывороточного ИЛ-5 и индуцированной продукции ИЛ-6 лейкоцитами крови у больных ОРВИ, осложненной пневмонией, представлены на рисунке 6. Для сывороточного ИЛ-5 критериальная величина составляла 8 пг/мл, значения, равные этой величине, отмечались у 87,5% больных аденовирусной инфекцией и у 62,5% больных респираторно-синцитиальной вирусной инфекцией, то есть данный показатель критерием служить не мог, несмотря на различия по средним величинам. Критериальной для второго показателя – индуцированной продукции ИЛ-6 лейкоцитами крови, служила величина 10800 пг/мл, в диапазон значений ниже этой величины входили все 100% больных аденовирусной инфекцией, а выше – 81,3% больных респираторно-синцитиальной вирусной инфекцией.
Таблица 2. Соотношение дискриминантных признаков в группах больных аденовирусной и респираторно-синцитиальной вирусной инфекцией осложненного течения
| Показатели цитокинного статуса | Средние значения | р | |
| АДВИ | РСВИ | ||
| Ангина (n1 = 40, n2 = 8) | |||
| Уровень сывороточного ИФН (Ед/мл) | 6,81 ± 3,24 | 2,50 ± 0,91 | 0,449 |
| Уровень спонтанного ИФН лейкоцитов (Ед/мл) (Ед/мл) | 2,6 ± 0,62 | 1,50 ± 0,50 | 0,835 |
| Уровень индуцированного ИФН? лейкоцитов (Ед/) | 239,4 ± 54,1 | 192,0 ± 54,0 | 0,781 |
| Уровень сывороточного ИЛ-12 (пг/мл) | 60,3 ± 10,0 | 121,1 ± 25,5 | 0,041 |
| Уровень спонтанного ИЛ-12 лейкоцитов (пг/мл) | 151,4 ± 52,9 | 160,9 ± 70,8 | 0,570 |
| Уровень индуцированного ИЛ-12 лейкоцитов (пг/мл) | 1213,2 ± 220,7 | 2484,7 ± 611,4 | 0,012 |
| Уровень спонтанного ИЛ-2 лейкоцитов (пг/мл) | 1101,9 ± 144,4 | 1472,6 ± 374,2 | 0,378 |
| Уровень индуцированного ИЛ-2 лейкоцитов (пг/мл) | 1112,9 ± 144,3 | 1356,9 ± 330,5 | 0,529 |
| Уровень сывороточного ИЛ-4 (пг/мл) | 278,8 ± 90,4 | 1795,6±1189,9 | 0,272 |
| Уровень сывороточного ИЛ-6 (пг/мл) | 7,99 ± 0,94 | 9,18 ± 1,39 | 0,383 |
| Уровень спонтанного ИЛ-6 лейкоцитов (пг/мл) | 458,7 ± 162,4 | 327,8 ± 157,8 | 0,280 |
| Уровень индуцированного ИЛ-6 лейкоцитов (пг/мл) | 14285 ± 1869 | 26516 ± 7095 | 0,033 |
| Уровень сывороточного ИЛ-1 (пг/мл) | 181,6 ± 78,3 | 374,6 ± 253,9 | 0,509 |
| Уровень сывороточного ФНО? (пг/мл) | 165,2 ± 66,7 | 402,8 ± 302,5 | 0,322 |
| Бронхит (n1 = 12, n2 = 22) | |||
| Уровень сывороточного ИЛ-2 (пг/мл) | 10,0 ± 0 | 12,0 ± 1,22 | 0,471 |
| Уровень спонтанного ИЛ-2 лейкоцитов (пг/мл) | 890,8 ± 138,0 | 487,3 ± 114,2 | 0,016 |
| Пневмония (n1 = 8, n2 = 16) | |||
| Уровень спонтанного ИЛ-2 лейкоцитов (пг/мл) | 1045,8 ± 167,7 | 1806,5 ± 354,7 | 0,127 |
| Уровень индуцированного ИЛ-2 лейкоцитов (пг/мл) | 1064,6 ± 152,7 | 1993,7 ± 386,2 | 0,127 |
| Уровень сывороточного ИЛ-5 (пг/мл) | 7,50 ± 0,50 | 12,4 ± 1,93 | 0,037 |
| Уровень индуцированного ИЛ-6 лейкоцитов (пг/мл) | 4593,7 ± 1427,4 | 39236 ± 18563 | 0,002 |
| Уровень сывороточного ИЛ-1 (пг/мл) | 16,9 ± 2,66 | 20,0 ± 9,93 | 0,052 |
Примечание: р – вероятность различий между данными у больных аденовирусной и респираторно-синцитиальной вирусной инфекцией, серым цветом обозначена достоверность различий по критерию Манна-Уитни при р1 – число больных АДВИ, n2 – число больных РСВИ.
Таким образом, как при неосложненном, так и при осложненном течении ОРВИ, вызванных аденовирусом и респираторно-синцитиальным вирусом, определение цитокинового статуса помогает не только оценить патогенетическое значение отдельных цитокинов и прогнозировать развитие осложнений, а также может способствовать дифференциальной диагностике инфекционных процессов рассматриваемой этиологии, хотя и в качестве не абсолютных, а дополнительных критериев.
Относительными дифференциальными признаками аденовирусной и респираторно-синцитиальной вирусной инфекций являются:
- при неосложненном течении уровень сывороточного ИЛ-1 выше 12 пг/мл свидетельствует о наличии аденовирусной инфекции;
- при осложнении ангиной уровень сывороточного ИЛ-12 ниже 95 пг/мл и уровень индуцированной продукции лейкоцитами ИЛ-12 ниже 1800 пг/мл свидетельствуют больше в пользу аденовирусной инфекции, а уровень индуцированной продукции лейкоцитами ИЛ-6 выше 15000 пг/мл – в пользу респираторно-синцитиальной вирусной инфекции;
- при осложнении бронхитом уровень спонтанной продукции ИЛ-2 ниже 650 пг/мл указывает на течение респираторно-синцитиальной вирусной инфекции;
- при осложнении пневмонией уровень индуцированной продукции ИЛ-6 лейкоцитами крови ниже 10800 пг/мл с высокой долей вероятности свидетельствует в пользу аденовирусной инфекции.
При определении целесообразности применения Виферона в комплексном лечении аденовирусной и респираторно-синцитиальной вирусной инфекций у взрослых было выявлено, что включение в схему лечения больных аденовирусной инфекцией Виферона, высоко эффективно при лечении бронхита. При применении Виферона сокращалась длительность госпитализации (р Литература:
1. Echavarr?a M. Adenoviruses in immunocompromised hosts. Clin. Microbiol. ?2008. ?Vol.21.?№4.?P. 704–715
2. Walsh E. E., Falsey A. R., Hennessey P. A. Respiratory syncytial virus and other infections in persons with chronic cardiopulmonary disease. Am. J. Respir. Crit. Care Med.?1999.?Vol. 160.?P.791?795
3. Ogawa E., Elliott W.M., Hughes F., Eichholtz T.J. et al. Latent adenoviral infection induces production of growth factors relevant to airway remodeling in COPD. Am. J. Physiol. Lung Cell Mol. Physiol.? 2004.?Vol. 286.?№1.?P.189?197
4. Openshaw P.J., Dean G.S., Culley F.J. Links between respiratory syncytial virus bronchiolitis and childhood asthma: clinical and research approaches. Pediatr. Infect. Dis. J.? 2003.?Vol.22.?P.58–64
5. Sigurs N. RSV and RAD: possibilities for prevention? The link between respiratory syncytial virus and reactive airway disease. Respiratory Research.? 2002.?Vol 3.?№1.?P.8?14
6. Fern?ndez J.A., Tapia L., Palomino M.A., Larra?aga C. et al. Plasma interferon-gamma, interleukin-10 and soluble markers of immune activation in infants with primary adenovirus (ADV) and respiratory syncytial virus (RSV) infection. Eur. Cytokine Netw.? 2005.?Vol.16.?№1.?Р.35?40
Загрузка …
