Функциональное состояние Т- и В-клеточного звеньев иммунитета у часто болеющих ОРЗ детей

Е.В. Замахина, О.В. Кладова, В.Ф. Учайкин, Е.П. Бутакова, А.С. Базанова, Т.П. Легкова, Л.И. Фельдфикс.
ГОУ ВПО Российский государственный медицинский университет Росздрава,
Морозовская детская городская клиническая больница,
ГУ НИИ эпидемиологии и микробиологии им. Н.Ф. Гамалеи РАМН, Москва

В статье представлены результаты обследования 43 детей без клинических проявлений ОРЗ из группы ЧБД. Выявленная высокая продукция ИЛ-10, субклассов IgG1,2,3,4, ЦИК свидетельствует о текущем воспалительном процессе с функциональным напряжением Т- и В-клеточного звеньев иммунитета, возможно, в результате персистенции респираторных вирусов. Показано, что терапия вифероном способствует урежению эпизодов ОРЗ, снижению уровня ИЛ-10, повышению продукции субклассов IgG1,2,3,4 и образованию ЦИК, что можно трактовать, как активацию иммунологического реагирования с целью выведения персистирующих патогенов.

Ключевые слова: часто болеющие дети, ИЛ-10, субклассы IgG1,2,3,4, циркулирующие иммунные комплексы, виферон

Авторы:
Евгения Викторовна Замахина, аспирантка, врач-педиатр
Ольга Викторовна Кладова, д.м.н., профессор
Василий Федорович Учайкин, академик РАМН, д.м.н., профессор
Елена Павловна Бутакова, врач-педиатр
Анна Сергеевна Базанова, врач-педиатр
Татьяна Петровна Легкова, врач-педиатр
Лариса Изевна Фельдфикс, врач-педиатр

По современным представлениям в группу часто болеющих (ЧБД) принято относить детей, подверженных частым – от 6 до 12-15 раз в год – респираторным заболеваниям вне зависимости от возраста [1-4]. Известно также, что повышенная заболеваемость вирусно-бактериальными респираторными инфекциями у таких детей не связана со стойкими врожденными и наследственными патологическими состояниями (такими как муковисцидоз, врожденный стридор, селективный дефицит sIgA и др.), а возникает из-за транзиторных, корригируемых отклонений в защитных системах организма [5]. Однако ответить на вопрос, нарушения каких защитных систем могут иметь причинное значение, в настоящее время не представляется возможным. Теоретически можно допустить определенное значение реактивации персистирующей респираторной вирусной инфекции, тем более, что в ранее проведенных исследованиях была установлена возможность персистенции респираторных вирусов в организме после перенесенной острой инфекции, особенно у иммунодефицитных лиц [6-9]. Обнаружение маркеров респираторных вирусов у ЧБД без клинических проявлений ОРЗ, также свидетельствует об их персистенции, чему, возможно, способствуют отклонения в иммунной системе таких детей.

Последние исследования показали, что изменения в иммунной системе ЧБД связаны с ее морфофункциональной незрелостью (задержкой созревания по сравнению со сверстниками) [4,5,10]. В то же время для ЧБД характерна крайняя напряженность процессов иммунного реагирования, недостаточность резервных возможностей, что может быть результатом длительного и массивного антигенного воздействия на организм ребенка и сохранения вялотекущего воспаления [4,11], возможно, в результате персистенции респираторных вирусов.
Таким образом, изменения в иммунной системе ЧБД описаны, однако нет работ, где бы изучалась связь между персистирующей респираторной вирусной инфекцией и состоянием иммунитета, непонятным остается значение персистенции в развитии функциональных нарушений иммунного реагирования, и какую роль, в свою очередь, играет состояние иммунитета для поддержания персистенции респираторных вирусов.

Одним из показателей нарушенного иммунного реагирования у ЧБД является дисбаланс Т- и В-клеток. Высказываются мнения, что нарушения в системе Т- и В-клеточного звеньев иммунитета могут быть обусловлены как селективным дефицитом Т- и В-клеток, так и их функциональной несостоятельностью [10,12,13]. И поскольку, показателем функциональной активности Т-клеточного звена иммунитета является образование цитокинов, в частности противовоспалительного цитокина – интерлейкина-10 (ИЛ-10), а о состоянии В-клеточного звена принято судить по продукции иммуноглобулинов, особенно их субклассов, и по образованию циркулирующих иммунных комплексов (ЦИК), мы поставили своей задачей изучить продукцию ИЛ-10, субклассов IgG1,2,3,4, образование ЦИК и понять клинико-патогенетическое значение этих показателей у ЧБД.

Материалы и методы исследования

Под нашим наблюдением находились 43 ребенка из группы ЧБД без клинических проявлений ОРЗ на момент исследования и в течение предыдущего месяца; в их числе было 15 (35%) девочек и 28 (65%) мальчиков в возрасте от 10 месяцев до 5 лет: до 1 года – 4 (9,3%), от 1 до 3 лет – 15 (35%), от 3 до 5 лет – 24 (55,7%).

Частота эпизодов ОРЗ у детей составляла от 6 до 12 раз в год. В анамнезе частые ОРВИ осложнялись отитами – у 11, ангинами – у 8, гайморитами – у 3, бронхитами – у 8, пневмониями – у 3, по поводу чего они получали антибактериальную терапию, из них 12 детей неоднократно. У 8 детей в анамнезе отмечались рецидивирующие крупы от 3 до 10 раз, 14 детей перенесли дисбактериоз кишечника, 11 – имели гипертрофированные миндалины и/или аденоиды 2-3 степени, 2 детям была проведена аденотомия.

У 24 детей исследовали продукцию ИЛ-10 и субклассов IgG1,2,3,4 методом иммуноферментного анализа (ИФА), а также уровни ЦИК методом осаждения полиэтиленгликоля (ПЭГ).
Статистическая обработка результатов исследования проводилась с использованием программы «BIOSTAT». Все значения представлены в виде средней ± ошибка средней. Достоверность различия результатов исследования оценивалась по парному критерию Стьюдента (t). Различия считались достоверными при уровне доверительной вероятности (p) меньше 0,05.

Результаты и их обсуждение

Результаты проведенных исследований представлены в таблице 1.

Таблица 1.
Показатели иммунного ответа у ЧБД без клинических проявлений ОРЗ, n=24

* – [14]
** – [15]
*** – Показатели уровня IgG4 в каждой возрастной группе здоровых детей гетерогенны и референсные значения IgG4 у детей не посчитаны, кроме того; по данным P. Aucouturier с соавт. (1988 г.) IgG4 не обнаруживается у 9% здоровых женщин и у 1% здоровых мужчин, по данным V.A. Oxelius (1979 г.) – у 10-20% взрослых, A. Plebani с соавт. (1989 г.) не выявили IgG4 у 8% детей, что авторы считают физиологичным.

Как видно из представленных данных, средний уровень ИЛ-10 в крови ЧБД составил 43,43±8,93 пг/мл, т.е. практически в 10 раз превышал норму, при этом повышенная продукция ИЛ-10 отмечалась у всех 24 (100%) детей. У 11 (45,8%) детей показатели ИЛ-10 в крови превышали нормативные в 2-4 раза, у 5 (20,8%) – в 5-9 раз, у 8 (33,4%) – в 10 – 35 раз.
Средний уровень субкласса IgG1 составил 7,14±1,07 мг/мл и превышал нормальные значения в 2,9 раза, при этом дефицит отмечен у 7 (29,2%) детей, гиперпродукция – у 15 (62,5%), нормальные значения выявлены у 2 (8,3%) детей. Средний уровень IgG2 составил 2,4±0,24 мг/мл и превышал норму в 6 раз: дефицита IgG2 не отмечено, гиперпродукция выявлена у 23 (95,8%) детей, нормальное значение – у 1 (4,2%) ребенка. Средний уровень субкласса IgG3 составил 0,87±0,07 мг/мл и в 5,4 раза превышал норму: дефицита также отмечено не было, гиперпродукция выявлена у 23 (95,8%) детей, нормальное значение – у 1 (4,2%) ребенка. Средний уровень IgG4 составил 0,29±0,03 мг/мл [рис.1].

В целом, гипериммуноглобулинемия по одному или нескольким субклассам IgG выявлена у всех 24 (100%) ЧБД без клинических проявлений ОРЗ: по IgG1, IgG2, IgG3 – у 15 (62,5%) детей; по IgG2 и IgG3 – у 7 (29,2%), из них у 5 (20,8%) сочеталась с дефицитом IgG1, у 2 (8,3%) – с нормальным уровнем IgG1; только по IgG2 – у 1 (4,2%) ребенка, сочеталась с дефицитом IgG1 и нормальным уровнем IgG3; только по IgG3 – также у 1 (4,2%) ребенка, сочеталась с дефицитом IgG1 и нормальным уровнем IgG2. В свою очередь дефицит выявлен только в отношении субкласса IgG1 – у 7 (29,2%) детей, из них у 5 (20,8%) сопровождался гиперпродукцией IgG2 и IgG3, у 2 (8,3%) – гиперпродукцией только IgG2 или IgG3.
Содержание крупных ЦИК в крови ЧБД обнаруживало тенденцию к повышению, средний уровень их составил 21,46±1,94 OD/мин, что достоверно не отличалось от нормальных значений [табл.1]. Вместе с тем у 12 (50%) детей показатели крупных ЦИК были выше нормы, а у остальных – в пределах нормы. Средний уровень показателей крупных и мелких ЦИК составил 36,17±3,22 OD/мин [табл.1]. У 8 (33,3%) детей показатели крупных и мелких ЦИК превышали норму, что всегда сочеталось с повышенными показателями крупных ЦИК.
В целом, полученные данные можно трактовать, как свидетельство текущего воспалительного процесса с функциональным напряжением (стимуляцией) Т- и В-клеточного звеньев иммунитета. Очевидно, что в организме ЧБД имеет место формирование Th2–клеточного ответа, о чем свидетельствует гиперпродукция противовоспалительного (иммуносупрессорного) цитокина – ИЛ-10, как известно, способствующего угнетению Th1-клеточного ответа и функциональной активности макрофагов. В итоге у ЧБД снижается противовирусная защита и формируется длительно текущее воспаление за счет персистирующей вирусной инфекции. Кроме того, длительно сохраняющаяся персистенция респираторных патогенов способствует гиперпродукции одного или нескольких субклассов IgG1,2,3,4, в 50% случаев наблюдения – повышенному содержанию ЦИК.
Супрессивное действие ИЛ-10 основано на блокировании активации макрофагов, и прежде всего блокировании продукции макрофагами ИЛ-12, без которого тормозится развитие CD4+Th1 и, следовательно, тормозится основная противовирусная защита – развивается супрессия иммунного ответа 1 типа (т. е. клеточной формы иммунного реагирования, являющейся основной в противовирусной защите) [16,17]. О подобных изменениях в иммунной системе ЧБД свидетельствуют показатели, выявленные другими авторами: сниженная способность к продукции альфа-, гамма- и сывороточного интерферона, фагоцитарная активность нейтрофилов, хемотаксис и эстеразная активность макрофагов, клеточная цитотоксичность, повышенные показатели апоптоза и адгезии клеток, содержание провоспалительных цитокинов – ИЛ-2,4,6,8, IgE, ЦИК, дисбаланс Т- и В-клеток [10-13, 18-22].
Учитывая данные о персистенции респираторных вирусов, а также выявленные иммунологические изменения, с целью проведения этиотропной и иммуномодулирующей терапии ЧБД без клинических проявлений ОРЗ нами применялся препарат рекомбинатного альфа2–интерферона в сочетании с антиоксидантами (витаминами Е и С) – виферон в суппозиториях от 500 тыс. до 1 млн. per rectum ежедневно в течение 1 месяца. Известно, что под влиянием интерферона в организме усиливается активность цитотоксических лимфоцитов, CD4+T-лимфоцитов, фагоцитарная активность, интенсивность дифференцировки В-лимфоцитов, экспрессия антигенов MHC I и II типа, кроме того, препарат также непосредственно ингибирует репликацию, транскрипцию вирусов [23].

Для оценки эффективности проводимой терапии у ЧБД учитывались частота и тяжесть заболеваемости ОРЗ в течение месяца наблюдения, а также проведено исследование уровней ИЛ-10, субклассов IgG1,2,3,4, ЦИК через 30 дней от начала терапии вифероном [табл.2].
На фоне лечения вифероном в течение месяца ни у одного из детей не было отмечено присоединения интеркуррентных заболеваний.
Динамика показателей иммунного ответа на фоне терапии представлена в таблице 2.
Таблица 2.
Показатели иммунного ответа у ЧБД без клинических проявлений ОРЗ до и после терапии вифероном, n=24

* – [14]
** – [15]
*** – Показатели уровня IgG4 в каждой возрастной группе здоровых детей гетерогенны и референсные значения IgG4 у детей не посчитаны, кроме того, по данным Aucouturier P. с соавт. (1988г.) IgG4 не обнаруживается у 9% здоровых женщин и у 1% здоровых мужчин, по данным Oxelius V.A. (1979г.) – у 10-20% взрослых, Plebani A. с соавт. (1989г.) не выявили Ig G4 у 8% детей, что авторы считают физиологичным.

Как видно из представленных данных, через 30 дней лечения вифероном средний уровень ИЛ-10 снизился приблизительно в 1,5 раза и составил 27,52±4,87 пг/мл. Достоверное снижение уровня ИЛ-10 отмечено у 14 (58,3%) детей.

Через 30 дней лечения вифероном выявлена тенденция к повышению продукции субклассов IgG. Отмечалось умеренное повышение средних уровней IgG1, IgG3, IgG4, которые составили 7,96±0,96, 0,97±0,09 и 0,33±0,04 мг/мл соответственно. Отмечено достоверное повышение в 1,2 раза среднего уровня IgG2, который составил 2,82±0,28 мг/мл.
В целом, на фоне проведенного лечения вифероном у 21 (87,5%) ребенка отмечено повышение продукции одного или нескольких субклассов IgG, из них у 7 (29,2%) детей – повышение продукции всех четырех субклассов. У 7 (29,2%) детей с дефицитом IgG1 до лечения выявлено достоверное повышение его продукции в 3,8 раза с 0,97±0,47 до 3,7±1,29мг/мл.
Через 30 дней лечения вифероном отмечена тенденция к повышению образования крупных ЦИК, средней уровень их показателей составил 23,22±1,7 OD/мин, а также достоверное повышение в 1,3 раза среднего значения показателей крупных и мелких ЦИК, которое составило 45,62±2,47 OD/мин. При этом повышение образования ЦИК выявлялось преимущественно у детей с нормальными показателями ЦИК до лечения.

В целом, на фоне проведенного лечения вифероном у 18 (75%) детей отмечено повышение образования ЦИК: у 14 (58%) выявлено повышение показателей крупных, а также крупных и мелких ЦИК, у 1 (4,2%) ребенка – только крупных, у 3 (12,5%) – только крупных и мелких ЦИК.

Таким образом, у ЧБД на фоне лечения иммунотропным препаратом виферон в течение 30 дней в 58,3% выявлено снижение уровня ИЛ-10, в 87,5% – повышение продукции одного или нескольких субклассов IgG, в 75% случаев – повышение образования ЦИК.

Выводы

1. У ЧБД без клинических проявлений ОРЗ имеет место формирование Th2-клеточного ответа, связанного с высокой продукцией ИЛ-10, что способствует персистенции респираторных вирусов

2. У ЧБД без клинических проявлений ОРЗ наличие персистенции респираторных вирусов способствует гипериммуноглобулинемии по одному или нескольким субклассам IgG, а у 50% сочетается с повышенным уровнем ЦИК, что свидетельствует о невозможности санации организма от вирусных патогенов

3. Наличие персистенции респираторных вирусов, связанное с функциональными изменениями в Т- и В- клеточном звеньях иммунитета, обосновывает назначение этиотропной и иммуномодулирующей терапии

4. На фоне лечения иммунотропным препаратом виферон в течение 30 дней у ЧБД отмечается снижение уровня ИЛ-10 в 58,3%, повышается продукция одного или нескольких субклассов IgG в 87,5%, повышается образование ЦИК в 75% случаев, что можно трактовать, как активацию иммунологического реагирования. В течение месяца терапии вифероном не отмечалось присоединения ОРЗ

Литература
1. Маркова Т.П. Профилактика респираторных инфекций / Т.П. Маркова, Д.Г. Чувиров // Русский медицинский журнал. – 2004. – №1. – С. 5-7.
2. Barlett J.G. Management of respiratory tract infection. – 3rd ed. – Philadelphia. – 2001. – P. 178-182.
3. Кладова О.В. Профилактика ОРВИ «Гепоном» у часто болеющих детей // «Первый конгресс педиатров-инфекционистов России». – 2002.
4. Самсыгина Г.А. Часто болеющие дети: проблемы патогенеза, диагностики и терапии // Педиатрия. – 2004. – №1. – С. 66-73.
5. Часто и длительно болеющие дети: современные возможности иммунореабилитации / Н.А. Коровина, А.Л. Заплатников, А.В. Чебуркин, И.Н. Захарова // Руководство для врачей. – М., 2001. – 68с.
6. Фролов А.Ф. Персистенция вирусов. Механизмы и клинико-эпидемиологические аспекты. – Винница, 1995. – 233 с.
7. Зуев В.А. Медленные вирусные инфекции человека и животных. – М. Медицина, 1988. – 256 с.
8. Длительность выявления в лимфоцитах крови человека маркеров вируса гриппа / Е.И. Исаева и др. // Вопросы вирусологии. – 1994. – №6. – С. 262-265.
9. Postinternalization inhibition of adenovirus dene expression and infectious virus production in human T-cell lines / McNess A.L., Mahr J.A., Ornells D., Gooding L.R. // J. Virol. – 2004. – Jun. 78(13). – P. 6955-66.
10. Макарова З.С. Оздоровление и реабилитация часто болеющих детей в дошкольных учреждениях/ З.С. Макарова, Л.С. Голубева // Пособие для педагогов дошкольных учреждений. – М.: Владос, 2004. – 270 с.
11. Рациональная фармакотерапия часто болеющих детей / под ред. М.Г. Романцова // Пособие для врачей. – С-Пб., 2006. – 96 с.
12. Заплатников А.Л. Клинико-патогенетическое обоснование иммунотерапии и иммунопрофилактики вирусных и бактериальных заболеваний у детей. Автореф. дисс. д.м.н. – М., 2003.
13. Кузьменко Л.Г. Иммунокоррекция тактивином в комплексном лечении часто болеющих детей / Л.Г. Кузьменко, Ю.М. Лопухин, В.Я. Арион // Пособие для врачей. – М., 2005.
14. Age-specific analysis of normal cytokine levels in healthy infants / Berdat P.A. et all // Clin Chem Lab Med. – 2003 – Oct;41(10). – P. 1335-9.
15. Serum levels of IgG subclasses in the normal child. Evaluation by an immunoenzymatic method using monoclonal antibodies / P. Aucouturier, M. Berthier, D. Bonneau, J.L. Preud’homme // Arch Fr Pediatr. – 1988. – Apr;45(4). – P. 255-8.
16. Влияние интерлейкинов 4 и 10 на систему гемостаза in vitro / Ю.А. Витковский, Б.И. Кузник, Д.А. Еделев, А.В. Солпов // Иммунология. – 2001. – №1. – С. 43-45.
17. Хаитов Р.М. Иммунология. – М.: Геотар-медиа, 2006. – 320 с.
18. Кладова О.В. Клинико-патогенетическое обоснование применения ИРС19 у детей с бронхо-легочными заболеваниями / О.В. Кладова, Ф.С. Харламова // Вопросы современной педиатрии. – 2002. – т.1. – №3. – С. 36-39.
19. Соловьев В.Д. Интерфероны в теории и практике медицины / В.Д. Соловьев, Т.А. Бектимиров. – М., 1981.
20. Намазова Л.С. Часто болеющие дети / Л.С. Намазова, Р.М. Торшхоева // Материалы для интерактивного семинара. – М., 2005.
21. Иванова В.В. Иммунопатогенез инфекционной болезни у детей / В.В. Иванова, Г.Ф. Железникова, И.В. Шилова // Педиатрия. – 2005. -№4. – С. 61-65.
22. Острые респираторно-вирусные инфекции и бронхиальная астма / Ю.А. Штерншис, Н.В. Лизогуб, В.З. Кривицкая, В.Б. Гервазиева // Инфекционные болезни. – 2006. – т.4. – №3. – С. 18-21.
23. Малиновская В.В. Виферон / В.В. Малиновская, Н.В. Деленян, Р.Ю. Ариненко // Руководство для врачей. – М., 2007. – 87 с.

Рисунок 1. Продукция субклассов IgG1,2,3,4 у ЧБД без клинических проявлений ОРЗ, n=24

The functional condition of immune T- and B-cells in infants/children suffering from frequent respiratory infectious diseases
E.V. Zamakhina, O.V. Kladova, V.F. Uchaykin, E.P. Butakova, A.S. Bazanova, T.P. Legkova, L.I. Feldfix
Russian State Medical University of Ministry of Health Service, GOU VPO (State Educational Institution of High Medical Education),
Morozovskaya Children’s Municipal Clinical Hospital,
Research Institute of Epidemiology and Microbiology named after N.F. Gamaleya of Russian Academy of Medical Sciences, GU (State Institution), Moscow
The article covers the results of examination of 43 infants/children without clinical manifestations of respiratory infection from the group of infants/children suffering from frequent respiratory infectious diseases. The detected high production of IL-10, subclasses IgG1,2,3,4, circulating immune complexes indicates the current inflammatory process with the functional exertion of T- and B-cells, perhaps, because of persistent of respiratory viruses. The researchers have established that therapy with viferon reduces frequency of respiratory infections, makes for normalization of the level of IL-10, stimulates productions of subclasses IgG1,2,3,4 and circulating immune complexes. This effect may be interpreted as an activation of immune response to remove persistent pathogens.
Key words: infants/children suffering from frequent respiratory infectious diseases, IL-10, subclasses IgG1,2,3,4, circulating immune complexes, viferon

Как Вы защищаетесь от гриппа и ОРВИ?

Опрос анонимный

• Ношу маску
• Не хожу в общественные места
• Использую препараты для профилактики
• Закаляюсь в течение всего года

 Загрузка …

Пройти другие опросы

Читайте также:

• 
  

  

  Ребенок часто болеет ОРВИ

• 
  

  

  Что такое препараты с доказанной…

• 
  

  

  Нужны ли противовирусные препараты